CTLL-2(小鼠T細胞)(STR鑒定正確)
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英文名稱:CTLL-2
貨號: CL-0331
價格: ¥3000 ¥3000
注:凍存細胞需加收干冰運費,詳情請咨詢客服。
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | CTLL-2(小鼠T細胞) |
別稱 | CTLL2;CTLL(2) |
種屬 | 小鼠 |
生長特性 | 懸浮細胞 |
細胞形態(tài) | 淋巴母細胞樣 |
凍存條件 |
凍存液:90% FBS+10% DMSO 溫度:液氮 |
培養(yǎng)方案A(默認) |
生長培養(yǎng)基:RPMI-1640 [PM150110]+10% FBS [164210]+100 U/mL recombinant IL-2 [PCK025]+1.0 μg/mL Con A+1% P/S [PB180120] 培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO?,5%, 溫度:37℃ |
推薦傳代比例 | 1:2-1:3 |
推薦換液頻率 | 2-3次/周 |
注意事項 |
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參考資料(來源文獻)
背景描述 | CTLL-2細胞是一株具有細胞毒作用的IL-2依賴型的T-細胞株。 |
組織來源 | T細胞 |
細胞類型 | 轉(zhuǎn)化細胞系 |
生物安全等級 | BSL-1 |
受體表達情況 | interleukin 2 (IL-2), expressed |
保藏機構(gòu) | ATCC; TIB-214 DSMZ; ACC-27 ECACC; 93042610 |
位點信息
鑒定圖
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Tumor-activated IL-2 mRNA delivered by lipid nanoparticles for cancer immunotherapy(2024)
期刊:JOURNAL OF CONTROLLED RELEASE
DOI:10.1016/j.jconrel.2024.03.016
影響因子:10.8
引用產(chǎn)品: CTLL-2 細胞
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期刊:PROTEIN EXPRESSION AND PURIFICATION
影響因子:1.6
引用產(chǎn)品: CTLL-2 細胞
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期刊:Nature Communications
DOI:10.1038/s41467-023-40814-9
影響因子:16.6
引用產(chǎn)品: CTLL-2 細胞, A-375 細胞, LLC [LL/2; LLC1] 細胞, RAW 264.7 細胞
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期刊:JOURNAL OF CONTROLLED RELEASE
DOI:10.1016/j.jconrel.2023.08.055
影響因子:10.8
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期刊:JOURNAL OF CONTROLLED RELEASE
DOI:10.1016/j.jconrel.2022.12.026
影響因子:11.500
引用產(chǎn)品: RAW 264.7 細胞, DC2.4 細胞, CTLL-2 細胞, CTLL-2細胞專用培養(yǎng)基, BV2 細胞, U-87 MG 細胞
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Q1:CTLL-2細胞可以體外加因子誘導成CD8+嗎?
文獻顯示可以誘導為CD8+: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14989115/
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Q2:CTLL2細胞表達CD3,CD4,CD8嗎?
文獻顯示CD3,CD4,CD8不表達: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14989115/
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Q3:怎么去除死細胞?
低速離心(800rpm,離心3mim),主要是基于細胞密度和大小進行分離,死細胞和碎片比較輕,會殘留在上清,活的細胞會留在離心管底部哈。這個可以去除大部分死細胞和碎片,但不能完全去除(會有少許殘留)。
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Q4:有些細胞傳了幾代之后,突然出現(xiàn)了一些圓形的漂浮細胞,這是正常情況?
這個是正常的,細胞增殖是個動態(tài)的過程,每個細胞所處的狀態(tài)不完全一樣,這種漂浮的細胞里面可能是增殖后還未來的及貼下去的,也可能是一些衰老細胞,我們每次傳代的操作多少會引起一些細胞損傷導致細胞貼壁性能減弱。只要整體細胞增殖情況正常,存在少量這種細胞,可以繼續(xù)培養(yǎng)觀察看看。
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Q5:剛買回來的細胞傳多少代就凍存比較好?
建議細胞買回來擴增1~2代后先凍存一管,一周后復蘇看下細胞活力,確認細胞凍存條件合適后可以開始大量凍存。
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Q6:哪些因素會導致細胞死亡?
有多種因素可能導致這種情況:
1. 二氧化碳濃度不正確:檢查設置以確保 CO2 水平設置為適合您的細胞系的水平(通常在 5% 到 10% 之間);經(jīng)常檢查線路連接是否有泄漏,避免頻繁打開和關閉培養(yǎng)箱門。
2. 培養(yǎng)箱中的溫度波動:使用一個好用的溫度計在培養(yǎng)箱內(nèi)部監(jiān)測溫度。
3. 兩性霉素B或其他預防性抗生素/抗真菌藥物的濃度有毒:按照推薦的濃度使用。
4. 培養(yǎng)箱濕度不正確:檢查水盤中的水位,濕度對于許多細胞和培養(yǎng)基而言至關重要,通常我們需要保證培養(yǎng)箱時刻有水,也就是飽和濕度。
5. 培養(yǎng)基的滲透壓不正確:大多數(shù)哺乳動物細胞可以耐受 260 至 350 mOsm/kg 的滲透壓,過量添加某些試劑和藥物可能會影響滲透壓。
6. 微生物污染:細菌和真菌污染通常很容易看到;支原體污染的癥狀比較難辨別,需要仔細監(jiān)測細胞形態(tài)并定期進行檢測以及早發(fā)現(xiàn)污染。
7. 使用了不適當?shù)呐囵B(yǎng)基:確認所使用的培養(yǎng)基適用于您的細胞類型;需確認是否含有血清及必須營養(yǎng)成份、是否缺少某些微量元素成份、是否含有其他添加劑及藥物、培養(yǎng)基是否過效期、培養(yǎng)基保存方式是否得當。 -
Q7:CTLL-2細胞用什么凍存液凍存細胞比較好呢
細胞凍存建議提高細胞密度,凍存時細胞密度不宜在10^6/ml以下;細胞凍存條件建議使用90%FBS+10%DMSO凍存液,搭配程序性凍存盒使用。凍存的時候注意完全吹散細胞,保證凍存液包裹住每個細胞,這樣保存效果更好一些。
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Q8:CTLL-2細胞培養(yǎng)到什么程度可以傳代處理,培養(yǎng)過程中需要注意什么?
細胞對營養(yǎng)需求高,請使用優(yōu)質(zhì)胎牛血清培養(yǎng)。培養(yǎng)時維持5X10*5-1*10^6/ml以上密度培養(yǎng),細胞聚團懸浮生長,但需要注意培養(yǎng)基的消耗較大,換液頻率增加。細胞密度達到1X10*6/ml的量可準備傳代,大部分情況下細胞聚團生長,實驗室可以常備 IL-2,發(fā)現(xiàn)細胞狀態(tài)不好,散在細胞變多,細胞不生長等情況,以 100U/mL 的濃度添加 IL-2,培養(yǎng) 2-3 天后狀態(tài)會有改善;但有時候也有出現(xiàn)細胞單顆生長不聚團,也是持續(xù)增殖的,這種也正常培養(yǎng),屬于正?,F(xiàn)象,不用太擔心。
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Q9:CTLL-2細胞復蘇的時候有什么需要注意的事項么?
這個細多,黑點較多,需要按照2-3天換液一次持續(xù)培養(yǎng)2-3周以調(diào)整細胞狀態(tài),換液方式為離心重懸,注意吹打力度不宜過大,保證細胞吹散即可。同時注意細胞密度維持在1*10^6/ml,調(diào)整狀態(tài)過程中細胞碎片較多,死細胞較多會使整體細胞量下降,需要根據(jù)細胞量適當縮小培養(yǎng)體積以提高細胞密度(如將培養(yǎng)瓶豎置或換用孔板培養(yǎng)等)。當細胞出現(xiàn)聚團,此時細胞狀態(tài)才會逐步變好。正常情況下,細胞狀態(tài)以聚團為主時,狀態(tài)最佳。
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Q10:CTLL-2細胞表達il-2的α、γ、β受體嗎
CTLL-2細胞表達IL-2的受體,包括α鏈(CD25)、β鏈(CD122)和γ鏈(CD132)。這些受體共同組成了高親和力的IL-2受體復合體,能夠有效地結(jié)合IL-2并傳遞信號,促進細胞增殖和功能調(diào)節(jié)。IL-2 通過與 IL-2 受體 (IL-2R) 結(jié)合來調(diào)控細胞的功能。


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