NK-92MI（人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞）(STR鑒定正確)
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英文名稱：NK-92MI
貨號(hào)： CL-0533
價(jià)格： ￥2200 ￥2200
注：凍存細(xì)胞需加收干冰運(yùn)費(fèi)，詳情請(qǐng)咨詢客服。
套餐組合價(jià)
產(chǎn)品信息
| 產(chǎn)品名稱 | NK-92MI（人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞） |
| 別稱 | NK-92 MI;NK-92 mi;NK92-MI;NK92MI;NK-92 transfected with MFG-Hil2 |
| 種屬 | 人 |
| 生長(zhǎng)特性 | 懸浮細(xì)胞 |
| 細(xì)胞形態(tài) | 淋巴母細(xì)胞樣 |
| 凍存條件 |
凍存液：90% FBS+10% DMSO 溫度：液氮 |
| 培養(yǎng)方案A（默認(rèn)） |
生長(zhǎng)培養(yǎng)基：MEMα [PM150422]+0.2 mM Inositol+0.1 mM β-mercaptoethanol+0.02 mM Folic Acid+12.5% HS [164215]+12.5% FBS [164210]+1% P/S [PB180120] 培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO?，5%, 溫度：37℃ |
| 推薦傳代比例 | 5×10?-1×10? cells/mL |
| 推薦換液頻率 | 2-3次/周 |
| 注意事項(xiàng) |
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參考資料(來源文獻(xiàn))
| 背景描述 | NK-92細(xì)胞是從一位患有急進(jìn)性非霍奇金淋巴瘤的50歲白人男性外周血單核細(xì)胞衍生來的一株IL-2依賴型NK細(xì)胞株。NK-92MI細(xì)胞是轉(zhuǎn)染得到的源自NK-92細(xì)胞的IL-2非依賴的NK細(xì)胞株。親本細(xì)胞NK-92通過微粒體基因轉(zhuǎn)化法用逆轉(zhuǎn)錄病毒MFG-hIL-2載體攜帶的人IL-2cDNA進(jìn)行轉(zhuǎn)化?？赡苡捎谳d體整合到基因組DNA中，轉(zhuǎn)化是穩(wěn)定的。這株細(xì)胞對(duì)很多惡性細(xì)胞有細(xì)胞毒性；鉻釋放試驗(yàn)顯示它能殺死K562細(xì)胞和Daudi細(xì)胞。NK-92細(xì)胞有以下特征：CD2、CD7、CD11a、CD28、CD45、CD54表面標(biāo)記陽性；CD1、CD3、CD4、CD5、CD8、CD10、CD14、CD16、CD19、CD20、CD23、CD34和HLA-DR表面標(biāo)記陰性。其親本IL-2依賴的細(xì)胞株NK-92細(xì)胞及另一株同樣來源于NK-92細(xì)胞株的IL-2非依賴的細(xì)胞株NK-92CI都可從ATCC得到。NK-92MI細(xì)胞和NK-92CI細(xì)胞這兩個(gè)變種都包含、表達(dá)并合成hIL-2cDNA。NK-92MI細(xì)胞合成的IL-2水平比NK-92CI高，而親本細(xì)胞不合成表達(dá)。1998年9月提交到ATCC的培養(yǎng)物污染了支原體，其后代通過BM細(xì)胞周期蛋白處理21天消除支原體。處理后6周，用Hoechst染色、PCR和標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)測(cè)試進(jìn)行支原體檢測(cè)，結(jié)果都呈陰性。 |
| 年齡（性別） | 50Y;Male |
| 組織來源 | 外周血 |
| 細(xì)胞類型 | 腫瘤細(xì)胞 |
| 腫瘤類型 | 淋巴瘤細(xì)胞 |
| 生物安全等級(jí) | BSL-2 |
| 保藏機(jī)構(gòu) | ATCC; CRL-2408 |
位點(diǎn)信息
鑒定圖
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期刊：JOURNAL OF EXPERIMENTAL MEDICINE
影響因子：15.300
引用產(chǎn)品： NK-92MI 細(xì)胞
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LncRNA NCAL1 potentiates natural killer cell cytotoxicity through the Gab2-PI3K-AKT pathway(2022)
期刊：Frontiers in Immunology
影響因子：8.786
引用產(chǎn)品： NK-92MI 細(xì)胞
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期刊：International Immunopharmacology
DOI：10.1016/j.intimp.2021.108195
影響因子：5.700
引用產(chǎn)品： SK-Hep-1 細(xì)胞, Hep G2 細(xì)胞, NK-92MI 細(xì)胞, NK-92MI細(xì)胞專用培養(yǎng)基
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期刊：Biochemical And Biohysical Research Communicattons
DOI：10.1016/j.bbrc.2020.12.013
影響因子：3.100
引用產(chǎn)品： NK-92MI 細(xì)胞
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期刊：3 BIOTECH
DOI：10.1007/s13205-021-02817-5
影響因子：2.800
引用產(chǎn)品： Jurkat, Clone E6-1 細(xì)胞, NK-92MI 細(xì)胞
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Q1:怎么去除死細(xì)胞？
低速離心(800rpm，離心3mim)，主要是基于細(xì)胞密度和大小進(jìn)行分離，死細(xì)胞和碎片比較輕，會(huì)殘留在上清，活的細(xì)胞會(huì)留在離心管底部哈。這個(gè)可以去除大部分死細(xì)胞和碎片，但不能完全去除（會(huì)有少許殘留）。
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Q2:有些細(xì)胞傳了幾代之后，突然出現(xiàn)了一些圓形的漂浮細(xì)胞，這是正常情況？
這個(gè)是正常的，細(xì)胞增殖是個(gè)動(dòng)態(tài)的過程，每個(gè)細(xì)胞所處的狀態(tài)不完全一樣，這種漂浮的細(xì)胞里面可能是增殖后還未來的及貼下去的，也可能是一些衰老細(xì)胞，我們每次傳代的操作多少會(huì)引起一些細(xì)胞損傷導(dǎo)致細(xì)胞貼壁性能減弱。只要整體細(xì)胞增殖情況正常，存在少量這種細(xì)胞，可以繼續(xù)培養(yǎng)觀察看看。
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Q3:咨詢NK 92和NK 92MI的區(qū)別？
NK-92和NK-92MI 細(xì)胞是兩種來源于人類自然殺傷細(xì)胞 (NK cells) 的細(xì)胞系，它們之間有個(gè)關(guān)鍵的區(qū)別：NK-92 細(xì)胞依賴IL-2 生長(zhǎng)，培養(yǎng)過程中需要添加IL-2； NK-92 MI 自身可以分泌IL-2 ,它不需要外源性 IL-2 就可以生長(zhǎng)。
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Q4:剛買回來的細(xì)胞傳多少代就凍存比較好？
建議細(xì)胞買回來擴(kuò)增1~2代后先凍存一管，一周后復(fù)蘇看下細(xì)胞活力，確認(rèn)細(xì)胞凍存條件合適后可以開始大量?jī)龃妗?/p>
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Q5:哪些因素會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡？
有多種因素可能導(dǎo)致這種情況：
1. 二氧化碳濃度不正確:檢查設(shè)置以確保 CO2 水平設(shè)置為適合您的細(xì)胞系的水平（通常在 5% 到 10% 之間）；經(jīng)常檢查線路連接是否有泄漏，避免頻繁打開和關(guān)閉培養(yǎng)箱門。
2. 培養(yǎng)箱中的溫度波動(dòng)：使用一個(gè)好用的溫度計(jì)在培養(yǎng)箱內(nèi)部監(jiān)測(cè)溫度。
3. 兩性霉素B或其他預(yù)防性抗生素/抗真菌藥物的濃度有毒：按照推薦的濃度使用。
4. 培養(yǎng)箱濕度不正確：檢查水盤中的水位，濕度對(duì)于許多細(xì)胞和培養(yǎng)基而言至關(guān)重要，通常我們需要保證培養(yǎng)箱時(shí)刻有水，也就是飽和濕度。
5. 培養(yǎng)基的滲透壓不正確：大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞可以耐受 260 至 350 mOsm/kg 的滲透壓，過量添加某些試劑和藥物可能會(huì)影響滲透壓。
6. 微生物污染：細(xì)菌和真菌污染通常很容易看到；支原體污染的癥狀比較難辨別，需要仔細(xì)監(jiān)測(cè)細(xì)胞形態(tài)并定期進(jìn)行檢測(cè)以及早發(fā)現(xiàn)污染。
7. 使用了不適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基：確認(rèn)所使用的培養(yǎng)基適用于您的細(xì)胞類型；需確認(rèn)是否含有血清及必須營(yíng)養(yǎng)成份、是否缺少某些微量元素成份、是否含有其他添加劑及藥物、培養(yǎng)基是否過效期、培養(yǎng)基保存方式是否得當(dāng)。 -
Q6:NK-92MI細(xì)胞達(dá)到什么密度可以傳代？
細(xì)胞是成團(tuán)生長(zhǎng)的，培養(yǎng)過程細(xì)胞會(huì)聚集在培養(yǎng)瓶當(dāng)中某個(gè)區(qū)域生長(zhǎng)，可以輕輕晃勻之后，靜置5-10分鐘觀察，大部分區(qū)域100倍鏡下有6-8個(gè)細(xì)胞團(tuán)可以補(bǔ)液分瓶，推薦1:2-1:3傳代。
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Q7:NK-92MI細(xì)胞狀態(tài)不好的時(shí)候需要補(bǔ)加IL-2嗎？
此細(xì)胞是不依賴IL-2，培養(yǎng)過程無需添加IL-2，如果有部分死細(xì)胞，可以嘗試提高血清比例5%。如果是狀態(tài)特別差需要急救的情況，可以適當(dāng)添加IL-2，有助于細(xì)胞恢復(fù)狀態(tài)。
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Q8:NK-92MI細(xì)胞培養(yǎng)過程有單個(gè)細(xì)胞及碎片，是狀態(tài)不好了嗎？
細(xì)胞團(tuán)之間也是有一些單個(gè)的細(xì)胞即碎片，這個(gè)是正?，F(xiàn)象，平時(shí)不要刻意吹散細(xì)胞團(tuán)，如果細(xì)胞團(tuán)過大，可以輕輕晃動(dòng)或輕拍培養(yǎng)瓶，使細(xì)胞團(tuán)塊分散開。如果碎片過多，可以換液時(shí)800轉(zhuǎn)離心5分鐘，去除碎片，一周左右離心一次即可。
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Q9:不同引種單位的同一株細(xì)胞，RRID都是一樣的嗎？
是的，同一個(gè)細(xì)胞系只有一個(gè)RRID。
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Q10:凍存的細(xì)胞出現(xiàn)顏色不一致，有的紅有的粉，對(duì)復(fù)蘇會(huì)有影響嗎？
這種情況容易在不同凍存批次間出現(xiàn)，與凍存細(xì)胞的密度、凍存液配方、溫度導(dǎo)致pH變化等有關(guān)，偶爾有遇到這種情況，不是絕對(duì)性對(duì)細(xì)胞狀態(tài)有影響，可以復(fù)蘇看下。
識(shí)別碼示意圖
