普諾賽®軟骨類原代細胞分離培養(yǎng)試劑盒—突破細胞分離難點

原代細胞的體外分離與培養(yǎng)技術(shù)對于揭示生理和病理機制至關(guān)重要，其生物學(xué)特性更貼近體內(nèi)真實狀態(tài)，為研究提供可靠的實驗?zāi)Ｐ?。針對腦、血管、肝臟、軟骨、骨髓和心臟六大類組織，普諾賽®推出一系列高效、便捷的原代細胞分離培養(yǎng)試劑盒，助力科研人員突破細胞分離難點，獲取高純度、高活性的細胞資源。本期細胞學(xué)堂，我們將詳細介紹軟骨類原代細胞分離培養(yǎng)試劑盒，助您輕松獲得高純度、高活性細胞，順利開展相關(guān)細胞研究。

一、可提取細胞類型及研究應(yīng)用方向

不同部位的軟骨細胞在形態(tài)特征和應(yīng)力適應(yīng)性方面存在差異。常用于實驗研究的軟骨類原代細胞包括以下幾種：

• 關(guān)節(jié)軟骨細胞：即透明軟骨細胞，廣泛分布于負重關(guān)節(jié)（如膝關(guān)節(jié)）的關(guān)節(jié)面，是維持軟骨基質(zhì)穩(wěn)態(tài)、抵抗壓縮和摩擦的重要細胞類型。常用于骨關(guān)節(jié)炎、軟骨修復(fù)材料及關(guān)節(jié)力學(xué)響應(yīng)機制等領(lǐng)域研究。

• 髖臼軟骨細胞：屬于關(guān)節(jié)軟骨細胞的一種，位于髖臼關(guān)節(jié)面。其結(jié)構(gòu)和表型與關(guān)節(jié)軟骨細胞相似，但由于所處的應(yīng)力環(huán)境復(fù)雜，其在代謝活性和應(yīng)激響應(yīng)上具有一定特異性。常用于研究股骨頭壞死、髖關(guān)節(jié)發(fā)育異常及關(guān)節(jié)置換后修復(fù)機制等。

• 顳下頜關(guān)節(jié)軟骨細胞：是一種典型的“次級軟骨”細胞，是頜面骨發(fā)育和功能調(diào)控的關(guān)鍵細胞類型。其在不同層次中表達Ⅰ型和Ⅱ型膠原，具備軟骨與成骨的雙重表型。廣泛用于顳下頜關(guān)節(jié)紊亂（TMD）、咀嚼力學(xué)調(diào)控和次級軟骨發(fā)育機制等領(lǐng)域的研究。

• 椎間盤纖維環(huán)細胞：主要分布于椎間盤外周的纖維軟骨組織，兼具成纖維細胞和軟骨樣細胞特征。其主要功能為抵抗張拉力、維持椎間盤結(jié)構(gòu)穩(wěn)定。廣泛應(yīng)用于椎間盤退變、脊柱力學(xué)調(diào)控及椎間盤修復(fù)材料等研究領(lǐng)域。

二、普諾賽^®軟骨類原代細胞分離培養(yǎng)試劑盒

產(chǎn)品目錄

試劑盒組分及其作用

清洗液：用于清洗軟骨組織，去除雜質(zhì)，同時提供液體環(huán)境以浸潤組織和細胞，起保護和抑菌作用。

消化液：用于分解組織中細胞相連的各種蛋白質(zhì)，促進組織解離為單細胞懸液。

基礎(chǔ)培養(yǎng)基與添加劑：為細胞提供必需的養(yǎng)分和生長環(huán)境，可促進目標細胞的優(yōu)先生長。

細胞濾網(wǎng)：用于過濾目的細胞外的雜質(zhì)和未完全消化的組織，提高目標細胞純度。

試劑盒提取細胞圖展示（部分）

	形態(tài)觀察	免疫熒光鑒定
大鼠關(guān)節(jié)軟骨細胞(Collagen Ⅱ)
小鼠關(guān)節(jié)軟骨細胞(Collagen Ⅱ)
大鼠髖臼軟骨細胞(Collagen Ⅱ)
大鼠顳下頜關(guān)節(jié)軟骨細胞(Collagen Ⅱ)
大鼠椎間盤纖維環(huán)細胞(Collagen Ⅰ)
小鼠椎間盤纖維環(huán)細胞(CollagenⅠ)

采用普諾賽^®試劑盒分離的軟骨類原代細胞展現(xiàn)出優(yōu)異的實驗特性：細胞貼壁良好，具有增殖能力和典型的細胞形態(tài)學(xué)特征，狀態(tài)穩(wěn)定；目標細胞的特異性標志物呈陽性表達，純度可達90%以上。該試劑盒分離的細胞，實驗重復(fù)性和結(jié)果一致性良好，適用于后續(xù)實驗操作。

三、軟骨類細胞提取與培養(yǎng)常見問題整理

1、是否必須使用14 日齡的大小鼠？更大或更小鼠齡是否也適用于本軟骨類分離培養(yǎng)試劑盒？

• 2-4周齡的鼠均可使用本試劑盒進行細胞提取，但多次實驗驗證表明，14日齡的鼠成功率更高。這是因為14日齡鼠的軟骨組織更多，細胞活性較高，分離效果優(yōu)異。

• 若使用更小鼠齡的鼠，組織量相對有限，細胞得量偏少。

• 若使用更大鼠齡的鼠，軟骨逐漸生長成熟為骨組織，組織量減少，且細胞活性下降。如確有實驗需要，可嘗試提取，但需注意細胞貼壁時間可能會有差別。

2、軟骨組織消化時間是否一定嚴格為48 h？是否可以進行適當?shù)恼{(diào)整？

• 軟骨組織常見消化時間為24-48 h，并非固定為48 h，可根據(jù)實際情況適當調(diào)整。消化時間主要由組織塊大小決定。建議在消化過程中定期觀察組織塊狀態(tài)，當組織塊明顯變小或幾乎消失，且消化液中可見大量游離的細胞時，可以通過吹打促進細胞釋放并終止消化。

3、取材過程中如果出現(xiàn)剪刀混用或者組織落在解剖板上，是否可以繼續(xù)使用樣本？

• 剪刀混用：需嚴格按照說明書上推薦的剪刀編號順序使用。

    ①若在應(yīng)使用1號剪刀時誤用了更潔凈的2號剪刀，污染風(fēng)險低，組織可以繼續(xù)使用，但需要重新準備無菌剪刀以替代被使用的剪刀。

    ②若在應(yīng)使用2號剪刀時誤用1號剪刀（污染風(fēng)險增加），則組織存在較大污染風(fēng)險，不建議繼續(xù)使用。

• 組織落在解剖板：解剖板通常難以保持無菌狀態(tài)，一旦組織接觸板面，污染風(fēng)險較高，不建議使用該組織樣本。

以上是關(guān)于軟骨類原代細胞分離培養(yǎng)試劑盒介紹及細胞提取常見問題的解析。更多原代細胞分離培養(yǎng)試劑盒詳情，請持續(xù)關(guān)注細胞學(xué)堂專欄~