細(xì)胞學(xué)堂 | 收到的細(xì)胞脫落了？碎片多？黑點多？

科學(xué)研究中需要用到各種細(xì)胞系作為實驗?zāi)Ｐ?，這些細(xì)胞系通?？梢詮母鞔蠹?xì)胞庫獲取。

而在收到細(xì)胞庫寄送來的常溫細(xì)胞時，常常會遇到一些問題，比如細(xì)胞脫落、皺縮、有黑點。

這篇文章將幫助大家解決這些常見問題。

一、收貨時，細(xì)胞脫落

有些細(xì)胞本身貼壁不牢，很容易造成細(xì)胞脫落（如293系列，TM3，TM4，Raw264.7，原代內(nèi)皮細(xì)胞，原代平滑肌細(xì)胞）。

另外，運輸過程中受到碰撞或氣溫過低，也可能導(dǎo)致細(xì)胞脫落。

處理辦法

① 將脫落細(xì)胞進(jìn)行離心收集，并在離心管中消化。

② 仍然貼壁的細(xì)胞，按照常規(guī)方法加入胰酶或其他解離劑消化。

③ 再將消化好的脫落細(xì)胞和貼壁細(xì)胞混合，按比例接種到新的培養(yǎng)器皿中。

常溫運輸?shù)腃2C12細(xì)胞收貨時發(fā)現(xiàn)脫落細(xì)胞

C2C12細(xì)胞處理后第二天，有少量漂浮細(xì)胞

C2C12細(xì)胞處理后第四天，細(xì)胞正常生長

（圖片由客戶提供，僅供學(xué)習(xí)參考）

二、收貨時，細(xì)胞皺縮

運輸過程中，路途顛簸加上溫度不穩(wěn)定，常溫細(xì)胞會發(fā)生回縮。

處理辦法

放入培養(yǎng)箱靜置2-4小時，若4小時后仍然沒有伸展，延長靜置時間。注意，過夜靜置時，需倒出部分培養(yǎng)基，留5-10mL在瓶中，瓶蓋擰松透氣，保持氣體交換（L15培養(yǎng)體系除外）。

若有脫落細(xì)胞，需離心收集。

SH-SY5Y細(xì)胞發(fā)貨前狀態(tài)(普諾賽提供)

SH-SY5Y細(xì)胞收貨后狀態(tài)(客戶提供)

SH-SY5Y細(xì)胞收貨時皺縮、脫落

SH-SY5Y細(xì)胞處理后第三天

（圖片由客戶提供，僅供學(xué)習(xí)參考）

三、收貨時，細(xì)胞黑點較多

當(dāng)受到運輸環(huán)境影響時，細(xì)胞會發(fā)生應(yīng)激反應(yīng)，分泌活動增加，導(dǎo)致分泌蛋白增多，呈黑色圓球狀，分布無規(guī)律。

同時，路途中凋亡的細(xì)胞碎裂后將產(chǎn)生細(xì)胞碎片，為黑色或透明色，呈不規(guī)則狀，分布無規(guī)律。

另外，有些細(xì)胞本身分泌活動較強(qiáng)，培養(yǎng)時常伴隨黑點。

處理辦法

★貼壁細(xì)胞放培養(yǎng)箱靜置2-4小時后，正常換液或傳代；

★懸浮細(xì)胞800~1000rpm（約160~200g） 低速離心3min去除細(xì)胞碎片。通常培養(yǎng)數(shù)天后，細(xì)胞狀態(tài)會逐漸穩(wěn)定下來。

KYSE-30細(xì)胞收貨時觀察到細(xì)胞碎片

KYSE-30細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)后細(xì)胞碎片減少

（圖片由客戶提供，僅供學(xué)習(xí)參考）

小貼士：遇到小黑點問題時，首先要排除微生物污染，再按以上辦法解決哦~

細(xì)胞碎片/分泌物和微生物污染的區(qū)別

細(xì)胞碎片（由客戶提供，僅供學(xué)習(xí)參考）

微生物污染（由客戶提供，僅供學(xué)習(xí)參考）